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培养基的发展史
发布时间:2013-10-10 点击次数:313次

培养基的发展史

   zui初进行细胞培养是使用天然培养基,即组织提取物和体液,例如:鸡胚浸出液,血清,淋巴液等。随着细胞系的不断增加,对质量更加稳定的培养基的需求也不断地增加,由此出现了化学成分明确的培养基,它是通过对体液成分的分析以及营养生物化学的研究而产生的。Eagle’s Basal Medium[Eagle,1955]以用后继的Eagle’sMinimal Es-sential Medium (MEM)[Eagle。1959]成为广泛采用的合成培养基,它们可以添加各种补充成分,如:牛血清,人血清,马血清,蛋白水解物及胚胎提取物。随着更多连续细胞系的出现(L929,Hela等),各种合成培养基成为培养绝大多数细胞zui好的选择。在合成培养基的发展过种有几点成功之处:可替代血清;针对不同类型的细胞制备zui适宜的培养基(例如:RPMI1640适合于类成淋巴细胞系);根据特殊的条件修正培养基(例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963])。

分离和繁殖某种特殊类型的细胞可能需要一种选择性的无血清培养基;而为了得到产物所进行的细胞培养(例如将细胞作为病毒繁殖的宿主,或将细胞用于非细胞特异性的分子生物学研究)则主要依赖于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是现在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].然而许多工业化生产技术现在使用的是无血清培养基,这样做有利于产物的下游处理并可减少外来污染.在许多实验室还流行一种折中的方法:即将一种成分复杂的培养基(例如Ham’s F12[Ham,1965])与一种氨基酸和维生素含量较高的培养基(例如:DMEM)混合使用.这种培养基不利于纯化产物,但对于原代培养以及细胞系的繁殖却可以产生多方面的促进作用.


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