当前位置:
产品展示Products
孔雀石绿快速检测试剂盒
更新时间:2019-06-12
型    号:
所属分类:兽 药 残 留 ,激素类ELISA快速检测试剂盒
报    价:
分享到:

孔雀石绿检测试剂盒优惠促销中垂询! 孔雀石绿快速检测试剂盒用于检测相应残留物孔雀石绿的含量。

孔雀石绿快速检测试剂盒产品概述:

孔雀石绿快速检测试剂盒说明书

 

一、原理

本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物孔雀石绿将和 微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗孔雀石绿抗体, 加入酶标记物后,用 TMB 底物显色,样本吸光值 与其所含残留物孔雀石绿的含量成负相关,与标准 曲线比较即可得出相应残留物孔雀石绿的含量。

二、试剂盒特性

试剂盒灵敏度:  0。05ppb

孵育温度:    25

孵育时间:    30min30min15min

样本检测限

 

水样 ———————— 0.1ppb

 

水产品 ·——————+—— 0。5ppb

 

  • 交叉反应率

 

隐性孔雀绿 ————————

0。1%

结 晶 紫

—————————

95%

隐性结晶紫

—————————

0.1%

 

  • 样本回收率

 

水样、水产品 ————————  80%~110%

 

  • 精密度

板内、板间变异系数≤12%

 

三、试剂盒组成

1

微量测试孔

每条 8 孔,一板 12 条

 

 

 

 

 

10 倍浓缩标准液

0ppb

0。5ppb

 

×6 瓶

 

 

2

1。5ppb

4.5ppb

 

 

 

 

 

1ml/瓶、黑色帽) 13.5ppb

40.5ppb

3

酶标记物

12ml

红色帽

 

 

 

 

4

抗体工作液

7ml

蓝色帽

 

 

 

 

 

5

底物 A 液

7ml

白色帽

 

 

 

 

6

底物 B 液

7ml

黑色帽

 

 

 

 

7

终止液

7ml

黄色帽

 

 

 

 

8

20X 浓缩洗涤液

40ml

白色帽

 

 

 

 

9

氧化剂

3ml

黑色帽

 

 

 

 

10

4X 浓缩复溶液

50ml

透明帽

 

 

 

 

 

四、所用仪器、试剂

具备的仪器:酶标仪、均质器、振荡器、离心机、 刻度移液管、天平(感量 0。01g)、氮 吹仪、恒温箱微量移液器:单道 20200µl、单道 1001000µl、多道 30300 µl

 剂:乙腈、二氯甲烷、无水硫酸钠、正己烷

五、样本前处理步骤

样本处理前须知

a)实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试 剂时要更换吸头。

b)实验之前须检查各种实验器具是否干净, 必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实 验结果。

 样本前处理需配制: 配液 1 样品提取液乙腈-二氯甲烷混合溶液:

V 乙腈-V 二氯甲烷 = 4 : 1 40ml 乙腈, 再加入 10ml 二氯甲烷,混匀后使用。

配液 2 样品复溶液

将 4X 浓缩复溶液用去离子水按 13 稀释 (1 份 4×浓缩复溶液+3 份去离子水),或按所需用 量配制。

 样本处理:

a)水样处理方法

取 50µl 清澈水样样直接测定(如果水样浑浊 一定要过滤或 4000r/min 离心 10min,直至得到 清澈样),暂不使用的样本应冷冻保存。

样本稀释倍数:  1 倍

b)水产品处理方法

1、称取 2±0.05g 均质组织样品于 50ml 离心管中, 加入 6ml 样品提取液(配液 1),2g 无水硫酸 钠,振荡 5min ,室温(25℃左右)4000r/min以上离心 10min

2、取 3ml 上清液,加入 20µl 氧化剂,摇匀,在 56 条件下氮气或空气流吹至完全干燥;

3、加入 1ml 正己烷,加入 1ml 样品复溶液(配液2),振荡摇匀 1min4000r/min 以上离心 5min

 

4、取下层 50 µl 用于分析;

样本稀释倍数:  1 倍

注:此方法所得到的结果为孔雀石绿;隐性孔 雀石绿;结晶紫;隐性结晶紫的总量。

六、酶标免疫分析程序:

测定前应须知:

1、 使用前将需用试剂和板条的温度回升至室温 2025℃)。

2、 使用之后立即将所有试剂放回 28℃。

3、 在 ELISA 分析中的再现性,很大程度上取决于 洗板的一致性,正确的洗板操作是 ELISA 测定 程序中的要点。

4、 所有恒温孵育过程,避免光线照射,用盖板膜 盖住微孔板。

操作步骤:

1、从 28℃冷藏环境中取出所需试剂,室温(20 25℃)平衡 30min 以上,注意每种液体试剂使 用前均须摇匀。

2、取出框架及需要数量的微孔,将不用的微孔放 入自封袋,保存于 2-8℃。

3、配液 1:将 40ml 浓缩洗涤液(20 倍浓缩)用去 离子水按照 119 稀释(1 份浓缩洗涤液+19 份 去离子水),或按所需用量配制洗涤液。

配液 2

配制孔雀石绿标准液:取一定量的 10 倍浓缩

标准液用样品复溶液 10 倍稀释,现配现用, 具体如下:

标准液6配制4。05ppb 标准液--50ul 40.5ppb标准液加 450ul 样品复溶液混匀;

标准液5配制1.35ppb 标准液--50ul 13.5ppb标准液加 450ul 样品复溶液混匀;

标准液 4配制 0.45ppb 标准液-- 50ul 4。5ppb标准液加 450ul 样品复溶液混匀;

标准液 3配制 0.15ppb 标准液-- 50ul 1.5ppb标准液加 450ul 样品复溶液混匀;

标准液 2配制 0。05ppb 标准液-- 50ul 0.5ppb标准液加 450ul 样品复溶液混匀;

标准液 1配制 0ppb 标准液-- 50ul 0ppb 准液加 450ul 样品复溶液混匀;

4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每 个样本和标准品做 2 孔平行,并记录标准孔和 样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本 50µl/孔到各自的微孔中,然后加 入抗体工作液 50µl/孔,用盖板膜封板,轻轻振 荡混匀。25℃环境中反应 30min

6、将孔内液体甩干,用已稀释的洗涤液 250µl/ 洗板 45 次,每次间隔 1530 秒,用吸水纸 拍干(拍干后未清除的气泡可用干净的枪头刺 破)。

7、每孔加入酶标记物 100µl,盖板膜盖板后置25 环境中反应 30min。将孔内液体甩干,用洗涤 液充分洗,45 遍(同上),用吸水纸拍干(拍 干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。

8、显色:加入底物 A  50µl/孔,再加入底物 B 液 50µl/孔,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光显 色 15min。

9、测定:加入终止液 50µl/孔,轻轻振荡混匀,设 定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长 450/630n 检测,5min 内读数),测定每孔 OD 值。

七、结果判定

结果判定有两种方法,粗略判定可用第 1 种方 法,定量判定用第 2 种方法。注意样本吸光度值与 其所含孔雀石绿量成负相关。

1、粗略判定:

用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出 其浓度范围(ng/ml)。假设样本 1 的吸光度值为 0.3, 样本 2 的吸光度值为 1。0,标准液吸光度值分别是:

0ppb  2.2430.05ppb  1。8160。15ppb  1.415 变质。

0.45ppb  0.741。35ppb  0.3134。05ppb  0.155。  8、该试剂盒zui佳反应温度为 25℃,温度过高或过则样本 1 的浓度范围是 1.35ppb4.05ppb;样本 2的浓度范围是 0.15ppb0。45ppb,乘以其对应的 释倍数即为样本中孔雀石绿实际浓度。

2、定量分析

1)百分吸光率的计算,标准品或样本的百分 吸光率等于标准品或样本的吸光度值的平均值(双 孔)除以第一个标准(0 标准)的吸光度值,再乘 以 100%,即

B

百分吸光率(%)= ×100% B0

低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

九、储藏条件和保质期

1、储藏条件:试剂盒于 2-8℃保存,不要冷冻。 2、保 质 期:该产品有效期为 1 年,生产日期见

包装盒。

提示:酶标板真空包装袋若有漏气,酶标板仍然正 常有效,不影响实验结果,请放心使用。

B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值 B0—0ng/ml 标准溶液的平均吸光度值

2)标准曲线的绘制与计算 以标准品百分吸光率为纵坐标,以孔雀石绿标准品浓度(ng/ml)的半对数为横坐标,绘制标准曲 线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标 准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的 释倍数即为样本中孔雀石绿实际浓度。

若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于 大量样本的准确、快速分析。

八、 注意事项

1、室温低于 25℃或试剂及标本未回到室温(2025℃)会导致所有标准的 OD 值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会 伴随着标准曲线不成线性,重复性不好的现象。 所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、混合要均匀,否则会出现重复性不好的现象。

4、反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒;稀释或搀杂 使用会引起灵敏度、OD 值变化;不要交换使用 不同批号的盒中试剂。

6、不用的微孔板放进自封袋重新密封;标准物质 和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴 露在光线下。

7、显色液若有任何颜色表明变质,应当弃之。标 准品 1 的吸光度值小于 0.5 时,表示试剂可能

 

鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒

喹诺酮类快速检测试剂盒

莱克多巴胺快速检测试剂盒说明书

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
联系人
在线客服
用心服务成就您我
秒速赛车开户 百万彩票 秒速赛车官网 pc蛋蛋 秒速赛车计划 秒速赛车开户 秒速赛车网站 秒速赛车开户 秒速赛车平台